生物實(shí)驗室安全以及防護措施
2003年春季爆發(fā)流行的傳染性非典型肺炎給實(shí)驗室工作人員敲響了警鐘,實(shí)驗室生物安全防護問(wèn)題日益得到人們重視。
我國《實(shí)驗室生物安全通用要求》國家標準已正式發(fā)布,并于2004年10月1日正式實(shí)施。該標準就實(shí)驗室生物安全管理和實(shí)驗室的建設原則作了規定,同時(shí)還規定了生物安全分級、實(shí)驗室設施設備的配置、個(gè)人防護和實(shí)驗室安全行為等方面內容。該標準解決了實(shí)驗室安全管理存在的隱患,將有效防止類(lèi)似生物安全事故的再次發(fā)生。
一、 實(shí)驗室生物安全分級
《實(shí)驗室生物安全通用要求》國家標準根據所操作的生物因子的危害程度和采取的防護措施,將生物安全實(shí)驗室的生物安全防護水平分為4級,Ⅰ級防護水平最低,Ⅳ級防護水平最高,確定了不同等級水平實(shí)驗室的建立和評價(jià)標準。
一級生物安全實(shí)驗室(BSL-1)為實(shí)驗室結構設施、安全操作規程、安全設備適用于對健康成年人已知無(wú)致病作用的微生物,如用于教學(xué)普通微生物實(shí)驗室等,具有Ⅰ級防護水平。
二級生物安全實(shí)驗室(BSL-2)為實(shí)驗室結構設施、安全操作規程、安全設備適用于對人或環(huán)境具有中等潛在危害的微生物,具有Ⅱ級防護水平。
三級生物安全實(shí)驗室(BSL-3)為實(shí)驗室結構設施、安全操作規程、安全設備適用于主要通過(guò)呼吸系統途徑使人傳染上嚴重甚至致死疾病的致病微生物及其毒素,具有Ⅲ級防護水平。
四級生物安全實(shí)驗室(BSL-4)為實(shí)驗室結構設施、安全操作規程、安全設備適用于對人體具有高度的危險性,通過(guò)氣溶膠途徑傳播或傳播途徑不明,目前尚無(wú)有效的疫苗或治療方法的致病微生物及其毒素,具有Ⅳ級防護水平。
根據以上定義,目前市、區兩級疾病預防控制機構實(shí)驗室因接觸可能含有致病微生物的標本,通常應達到二級生物安全實(shí)驗室(BSL-2)要求,BSL-2適用于對人或環(huán)境具有中等潛在危害的微生物,其與BSL-1的區別在于:(1)實(shí)驗人員是否接受過(guò)生物安全防護的培訓;(2)是否有進(jìn)入生物安全實(shí)驗室的限制措施;(3)對已經(jīng)受到或可能受到污染銳器的使用是否足夠重視;(4)某些可能產(chǎn)生傳染性氣溶膠或飛濺物的實(shí)驗過(guò)程,是否在生物安全柜中或其它物理抑制設備中進(jìn)行。
二、 實(shí)驗室設施設備的配置
生物安全實(shí)驗室防護水平不同,相應的實(shí)驗室設施設備的配置也不盡相同。
1、和BSL-1相關(guān)的病源,其操作一般不需要生物安全柜之類(lèi)的特殊遏制裝置或設備;實(shí)驗臺表面應能防水、耐熱、耐有機溶劑、耐酸堿和耐用于工作臺面及設施消毒的其他化學(xué)物質(zhì);應裝防止蒼蠅的窗紗。
2、BSL-2適用于對人或環(huán)境具有中等潛在危害的微生物,實(shí)驗室設施設備的配置及操作應遵循以下準則:
(1)任何時(shí)候都要使用正確保養的生物安全柜、最好是二級生物安全柜、或其他合適的人員防護設施、或物理遏制裝置。
確定可能形成傳染性氣溶膠或濺出物的實(shí)驗過(guò)程,包括離心、研磨、勻漿、劇烈震蕩或混勻、超聲波破裂、開(kāi)啟裝有傳染源的容器(容器內部的壓力可能與大氣壓不一致)、動(dòng)物鼻孔接種、從動(dòng)物或胚胎卵采集感染組織。
涉及高濃度或大體積的傳染源時(shí),若選用密封轉頭或帶安全罩的離心機,若轉頭或安全罩僅在生物安全柜中打開(kāi),則可在開(kāi)放實(shí)驗室內離心。
(2)當必須在生物安全柜外處理微生物時(shí),需采取面部保護措施(跟鏡、口罩、面罩、或其他防濺裝置),以免傳染源或其他有害物濺或灑到面上。
(3)在實(shí)驗室內,必須使用專(zhuān)用的防護性外衣、大褂、罩衫或制服。人員到非實(shí)驗室區域時(shí),防護服必須留在實(shí)驗室內。防護服可以在實(shí)驗室內處理,也可以在洗衣房中洗滌,但不能帶回家中。
(4)可能接觸潛在傳染源、被污染的表面或設備時(shí),要戴手套。戴兩副手套更合適。明顯污染的手套要處理,當有關(guān)傳染源工作結束時(shí)或手套損傷時(shí),要去掉手套。一次性手套不用清洗、不能重復使用,不能用于接觸“潔凈”的表面(鍵盤(pán)、電話(huà)等),也不應當戴著(zhù)到實(shí)驗室外。要備有帶滑石粉的乳膠手套。脫掉手套后,要洗手。
(5)實(shí)驗臺表面應能防水、耐熱、耐有機溶劑、耐酸堿和耐用于工作臺面及設施消毒的其他化學(xué)物質(zhì);應有眼睛沖洗裝置;如果實(shí)驗室有對著(zhù)外面的窗子,應裝防止蒼蠅的窗紗。
(6)安裝生物安全柜時(shí),要考慮到房間的通風(fēng)和排風(fēng),不會(huì )導致生物安全柜超出正常參數運行。生物安全柜應遠離門(mén)、遠離能打開(kāi)的窗,遠離行走區,遠離其他可能引起風(fēng)壓混亂的設備,保證生物安全柜氣流參數在有效范圍內。
需要提醒大家注意的是,對于新建實(shí)驗室在設計與建造方面一定要滿(mǎn)足實(shí)驗室安全方面的要求;對于已經(jīng)建成的實(shí)驗室,即使格局無(wú)法改變,也應努力將工作區與休息區分離,并盡可能滿(mǎn)足生物安全實(shí)驗室的其它要求。
三、 個(gè)人防護和實(shí)驗室安全行為
我們在參加突發(fā)事件應急處理的同時(shí),一定要保障的疾控人員的自身安全,防止出現實(shí)驗室感染和泄露。
1、一級生物安全實(shí)驗室(BSL-1)
(1) 穿實(shí)驗服、大褂、制服,避免污染和衣服上的塵土。
(2) 若手上皮膚有傷或出皮疹,應戴手套。
(3) 操作過(guò)程中,估計會(huì )出現微生物或危險物濺出時(shí),應戴保護眼具。
2、二級生物安全實(shí)驗室(BSL-2)
(1) 在開(kāi)展有關(guān)傳染病源工作時(shí),實(shí)驗室主任應禁止或限制人員進(jìn)入實(shí)驗室。一般情況下,易感人員或感染后會(huì )出現嚴重后果的人員,不允許進(jìn)入實(shí)驗室,例如,患有免疫缺陷或免疫抑制的人,其被感染的危險性增加。實(shí)驗室主任對每種情況的估計和決定誰(shuí)能進(jìn)入實(shí)驗室工作,負有最終責任。
(2) 實(shí)驗室人員接受適當的、和實(shí)驗室中處理或將要處理的病源有關(guān)的免疫接種或測試(如,乙肝免疫接種或TB皮試);根據所處理的病源,適當時(shí),收集和儲存適合于實(shí)驗室人員和有風(fēng)險人員使用的基本血清樣品。根據所處理病源或設施的功能,應定期收集其他血清樣品。
(3) 實(shí)驗室主任為實(shí)驗室人員特別制定的標準操作程序或生物安全手冊中,應包括生物安全程序。對于有特殊風(fēng)險的人員,要求閱讀并在工作及程序上遵照執行。
(4) 實(shí)驗室主任保證實(shí)驗及其輔助人員接受適當的培訓,包括和工作有關(guān)的可能存在的風(fēng)險、防止暴露的必要措施和暴露評估程序。當程序必需改變時(shí),有關(guān)人員必須每年更新知識,接受附加培訓。
(5) 存在外源性病源時(shí),實(shí)驗室入口處應貼有生物危險標志,并顯示以下信息:有關(guān)病源、生物安全級別、免疫接種要求、研究人員姓名、電話(huà)號碼、在實(shí)驗室中必須佩帶的個(gè)人防護設施、出實(shí)驗室所要求的程序
(6) 不許在工作區域飲食、吸煙、清洗隱型眼鏡和化妝。不允許在工作區存放食物和日常生活用品。在實(shí)驗室中,戴隱型眼鏡的人,也需戴口罩或面罩。食物應存放在工作區域以外專(zhuān)用櫥柜或冰箱中。
(7) 不能用嘴移液,只能用機械裝置移液;制定銳器安全使用規范。對于污染的銳器,必須時(shí)刻保持高度的警惕,包括針、注射器、玻片、加樣器、毛細管、手術(shù)刀;可以用其他器具的,就不要用銳器??赡軙r(shí),用塑料器具代替玻璃器具。打碎的玻璃器皿不能直接用手處理,必須用其它工具處理,如刷子和簸箕、夾子或鑷子。盛污染的針頭、銳器、碎玻璃的容器在到掉前,應按照規定進(jìn)行消毒。
(8) 所有的操作過(guò)程應盡量細心,避免產(chǎn)生濺出和氣溶膠;消毒至少一天一次,活體濺出時(shí),也應及時(shí)進(jìn)行臺面消毒。濺出或偶然事件中,明顯暴露于傳染源時(shí),要立即向實(shí)驗室主任報告。進(jìn)行適當的醫學(xué)評估、觀(guān)察、治療,保留書(shū)面記錄。
(9) 所有的培養物、儲存物及其它規定的廢物在釋放前,均應使用可行的消毒方法進(jìn)行消毒,如高壓滅菌。轉移到就近實(shí)驗室消毒的物料應置于耐用、防漏容器內,密封運出實(shí)驗室,其包裝應符合國家有關(guān)規定。