標準的PCR實(shí)驗室設計規劃與建設要求
2021-02-10 10:58:00
1、 主體結構：
主體為彩鋼板、鋁合金型材。室內所有陰角、陽(yáng)角均采用鋁合金50內圓角鋁，從而解決容易污染、積塵、不易清掃等問(wèn)題。結構牢固，線(xiàn)條簡(jiǎn)明，美觀(guān)大方，密封性好。
2、 標準的三區分隔和氣壓調節：
將PCR過(guò)程分成試劑準備、標本制備和PCR擴增檢測三個(gè)獨立的實(shí)驗區。整個(gè)區域有一個(gè)整體緩沖走廊。每個(gè)獨立實(shí)驗區設置有緩沖區， 同時(shí)各區通過(guò)氣壓調節，使整個(gè)PCR實(shí)驗過(guò)程中試劑和標本免受氣溶膠的污染并降低擴增產(chǎn)物對人員和環(huán)境的污染。
可打開(kāi)緩沖區Ⅰ，緩沖區Ⅱ和 PCR 擴增區的排風(fēng)扇往外排氣，在實(shí)驗區的外墻上和各扇門(mén)上都安裝有風(fēng)量可調的回風(fēng)口，空氣通過(guò)回風(fēng)口向室內換氣。
3、 消毒：
在三個(gè)實(shí)驗區和三個(gè)緩沖區頂部以及傳送窗內部安裝有紫外燈，供消毒用。
在試劑準備區和標本制備區 還設置移動(dòng)紫外線(xiàn)燈，對實(shí)驗桌進(jìn)行局部消毒。
4、 機械連鎖不銹鋼傳遞窗：
試劑和標本通過(guò)機械連鎖不銹鋼（不建議使用電子連鎖方式）傳遞窗傳遞，保證試劑和標本在傳遞過(guò)程中不受污染（人物分流）。
5、 地面
地面建議使用PVC卷材地面或自流坪地面，整體性好。便于進(jìn)行清掃，耐腐蝕。沒(méi)有條件的也可采用水磨石地面，或大塊的瓷磚（至少800mm×800mm）接縫需要小于2mm。
6、 照明
燈具要選用凈化燈具，能達到便于清洗、不積塵的特點(diǎn)。
在建設的過(guò)程中應注意：
●規范的安裝流程和全面的服務(wù)流程。
●嚴格按照規范科學(xué)設計的安裝流程。
●安裝前需要確定以下安裝條件，如：電源電壓，電源進(jìn)線(xiàn)位置，電話(huà)網(wǎng)絡(luò )線(xiàn)進(jìn)線(xiàn)位置，進(jìn)水水壓，最小安裝空間，地面平整度，通風(fēng)孔、進(jìn)水管和下水管的位置等，理想狀態(tài)的空間尺寸和通風(fēng)口尺寸。
PCR 即聚合酶鏈式反應，是分子生物學(xué)研究和實(shí)驗的常規方法，也是生物學(xué)、醫學(xué)臨床等領(lǐng)域廣泛應用的實(shí)驗技術(shù)。其特點(diǎn)是能將微量的DNA大幅增加。實(shí)驗室分為四個(gè)區域，進(jìn)入各工作區域必須嚴格按照單一方向進(jìn)行，不同的工作區域使用不同的工作服（例如不同的顏色）。工作人員離開(kāi)各工作區域時(shí)，不得將工作服帶出，四區域分別為：
n1.試劑配制區
n2.樣品處理區
n3.核酸擴增區
n4.產(chǎn)物分析區
n如使用全自動(dòng)分析儀，區域可適當合并
設計要求：
PCR實(shí)驗室可以是分散形式，也可以是組合形式。完成一組PCR實(shí)驗，通常應經(jīng)過(guò)試劑配制、樣品處理、核酸擴增及產(chǎn)物分析四個(gè)實(shí)驗過(guò)程，若實(shí)驗工藝需要，還應增加樣品粉碎過(guò)程。
一、分散形式PCR實(shí)驗室
所謂分散形式PCR實(shí)驗室，是指完成上述實(shí)驗過(guò)程的實(shí)驗用房彼此相距較遠，呈分散布置形式。對于這種布置形式的PCR實(shí)驗室，由于各個(gè)實(shí)驗之間不易相互干擾，因此無(wú)需特殊條件要求。
二、組合形式PCR實(shí)驗室
所謂組合形式PCR實(shí)驗室, 是指完成PCR四個(gè)實(shí)驗過(guò)程的實(shí)驗用房相鄰布置，組成獨立實(shí)驗區域的形式。對于組合形式PCR實(shí)驗室，由于各個(gè)實(shí)驗間集中布置，容易造成相互干擾，因此，對總體布局以及屏障系統具有一定的要求。各室在入口處設緩沖間，以減少室內外空氣交換。試劑配制室及樣品處理室宜呈微正壓，以防外界含核酸氣溶膠的空氣進(jìn)入，造成污染；核酸擴增室及產(chǎn)物分析室應呈微負壓，以防含核酸的氣溶膠擴散出去污染試劑與樣品。
如果使用熒光PCR儀，擴增室和產(chǎn)物分析室可以合并。
若房間進(jìn)深允許，可設PCR內部專(zhuān)用走廊。需要指出的是在減少室內外空氣交換方面，緩沖間比專(zhuān)用走廊更有意義。
各個(gè)區域之間應具備單向的實(shí)驗工藝流、物流、人流與氣流，形成單向流程的保護屏障，避免實(shí)驗之間的相互干擾，防止核酸氣溶膠對實(shí)驗過(guò)程造成污染產(chǎn)生假性結果。
實(shí)驗室的墻體，包括頂棚，應結構牢固、氣密性好；所有陰角宜采用圓弧形線(xiàn)條過(guò)渡；墻體內壁光潔、不吸附、耐腐蝕、易清洗消毒；地面材料應滿(mǎn)足無(wú)縫隙、無(wú)滲漏、光潔、耐腐蝕的要求。