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技術(shù)文章

實(shí)驗室培養基制備要求

2021-02-10 11:03:07

  培養基制備的質(zhì)量將直接影響微生物生長(cháng)。因為各種微生物對其營(yíng)養要求不完全相同,培養目的的不同,各種培養基制備要求如下:

  1.根據培養基配方的成分按量稱(chēng)取,然后溶于蒸餾水中,在使用前對應用的試劑藥品應進(jìn)行質(zhì)量檢驗。

  2.PH測定及調節:PH測定要在培養基冷至室溫時(shí)進(jìn)行,因在熱或冷的情況下,其PH有一定差異,當測定好時(shí),按計算量加入堿或酸混勻后,應再測試一次。培養基PH值一定要準確,否則會(huì )影響微生物的生長(cháng)或影響結果的觀(guān)察。但需注意因高壓滅菌可影響一些培養基的PH降低或升高,故不宜滅菌壓力過(guò)高或次數太多,以免影響培養基的質(zhì)量,指示劑、去氧膽酸鈉、瓊脂等一般在調完P(guān)H后再加入。

  3.培養基需保持澄清,便于觀(guān)察細菌的生長(cháng)情況,培養基加熱煮沸后,可用脫脂棉花或絨布過(guò)濾,以除去沉淀物,必要時(shí)可用雞蛋白澄清處理,所用瓊脂條要預先洗凈晾干后使用,避免因瓊脂含雜質(zhì)而影響透明度。

  4.盛裝培養基不宜用鐵、銅等容器,使用洗凈的中性硬質(zhì)玻璃容器為好。

  5.培養基的滅菌既要達到完全滅菌目的,又要注意不因加熱而降低其營(yíng)養價(jià)值,一般121℃15min即可,如為含有不耐高熱物質(zhì)的培養基如糖類(lèi)、血清、明膠等,則應采用低溫滅菌或間歇法滅菌,一些不能加熱的試劑如亞碲酸鉀、卵黃、TTC、抗菌素等,待基礎瓊脂高壓滅菌后涼至50℃左右再加入。

  6.每批培養基制備好后,應做無(wú)菌生長(cháng)試驗及所檢菌株生長(cháng)試驗。如果是生化培養基,使用標準菌株接種培養,觀(guān)察生化反應結果,應呈正常反應,培養基不應貯存過(guò)久,必要時(shí)可置4℃冰箱存放。

  7.目前各種干燥培養基較多,每批需用標準菌株進(jìn)行生長(cháng)試驗或生化反應觀(guān)察,各種培養基用相應菌株生長(cháng)試驗良好后方可應用,新購進(jìn)的或存放過(guò)久的干燥培養基,在配制時(shí)也應測PH,使用時(shí)需根據產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)用量和方法進(jìn)行。

  8.每批制備的培養基所用化學(xué)試劑、滅菌情況及菌株生長(cháng)試驗結果、制作人員等應做好記錄,以備查詢(xún)。

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